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          植物蛋白ZELISA试剂盒
          植物蛋白ZELISA试剂盒
          品名:
          植物蛋白ZELISA试剂盒
          货号:
          F15112-A
          产品品牌:
          科兴,TSZ
          价格:
          快速询价  QQ索要说明书 电话:15902171569
          友情提示:
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          植物蛋白Z酶联免疫分析

          试剂盒使用说明书

          本试剂盒仅供研究使用。

          检测范围:                                                          96T

          2 ng/L -50 ng/L

          使用目的:

          本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中蛋白Z含量

          实验原理

          本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物蛋白Z水平。用纯化的植物蛋白Z抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入蛋白Z再与HRP标记的蛋白Z抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的蛋白Z呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物蛋白Z浓度。

          试剂盒组成

          1

          30倍浓缩洗涤液

          20ml×1

          7

          终止液

          6ml×1

          2

          酶标试剂

          6ml×1

          8

          标准品(96ng/L

          0.5ml×1

          3

          酶标包被板

          12孔×8

          9

          标准品稀释液

          1.5ml×1

          4

          样品稀释液

          6ml×1

          10

          说明书

          1

          5

          显色剂A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2 

          6

          显色剂B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1

          标本要求

          1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融

          2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

          操作步骤

          1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

          48 ng/L

          5号标准品

          150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

          24 ng/L

          4号标准品

          150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

          12 ng/L

          3号标准品

          150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

          6 ng/L

          2号标准品

          150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

          3 ng/L

          1号标准品

          150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

          2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

          3.         温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。  

          4.         配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

          5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

          6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

          7.         温育:操作同3

          8.         洗涤:操作同5

          9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.

          10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

          11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

          操作程序总结:

          计算

            以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

          注意事项

          1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

          2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

          3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

          4.  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

          5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.底物请避光保存。

          7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

          8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

          9.本试剂不同批号组分不得混用。

          10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

          保存条件及有效期

          1.试剂盒保存:2-8

          2.有效期:6个月

          地址:上海市闵行区闵北路88弄1-17号、18-30号第22幢118室 手机:15902171569 13621709842 邮箱:shkxsw@163.com
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