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          • 上海科兴商贸有限公司
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          大鼠抑丝蛋白2(PFN2)ELISA试剂盒
           大鼠抑丝蛋白2(PFN2)ELISA试剂盒
          品名:
          大鼠抑丝蛋白2(PFN2)ELISA试剂盒
          货号:
          F11795-A
          产品品牌:
          科兴,TSZ
          价格:
          快速询价  QQ索要说明书 电话:15902171569
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          大鼠抑丝蛋白2(PFN2)酶联免疫分析
          试剂盒使用说明书
          本试剂盒仅供研究使用。
          检测范围: 96T
          6pg/ml-220pg/ml
          使用目的:
          本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中抑丝蛋白 2(PFN2)含量。
          实验原理
          本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠抑丝蛋白 2(PFN2)水平。用纯化的大鼠抑丝
          蛋白 2(PFN2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抑丝蛋白
          2(PFN2),再与 HRP 标记的抑丝蛋白 2(PFN2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
          经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
          转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抑丝蛋白 2(PFN2)呈正相关。用酶标仪在 450nm
          波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠抑丝蛋白 2(PFN2)浓度。
          试剂盒组成
          1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
          2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(400pg/ml) 0.5ml×1 瓶
          3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
          4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
          5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
          6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
          标本要求
          1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
          马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
          2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
          操作步骤
          1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
          释。
          200pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
          100pg/ml 4 号标准品 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          50pg/ml 3 号标准品 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          25pg/ml 2 号标准品 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          12.5pg/ml 1 号标准品 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
          待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
          然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
          量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
          3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
          4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
          5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
          重复 5 次,拍干。
          6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
          7. 温育:操作同 3。
          8. 洗涤:操作同 5。
          9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
          10 分钟.
          10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
          11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
          液后 15 分钟以内进行。
          操作程序总结:
           

            

          计算
          以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
          OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
          准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
          即为样品的实际浓度。
          注意事项
          1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
          用完,板条应装入密封袋中保存。
          2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
          3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
          控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
          4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
          大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
          算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          6.底物请避光保存。
          7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
          9.本试剂不同批号组分不得混用。
          保存条件及有效期
          1.试剂盒保存:;2-8℃。
          2.有效期:6 个月

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